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Lames et lamelles de microscopie : pourquoi l’épaisseur compte

Lames et lamelles de microscopie : pourquoi l’épaisseur compte

La lamelle fait partie du système optique du microscope. La plupart des objectifs sont corrigés pour une épaisseur de 0,17 mm : s’en écarter dégrade le contraste et la netteté, surtout à fort grossissement.

  • 0,17 mm

    l’épaisseur de lamelle pour laquelle la plupart des objectifs sont corrigés.

  • 76 × 26 mm

    le format courant des lames porte-objet en Europe.

  • n° 1,5

    le numéro d’épaisseur à demander pour approcher 0,17 mm.

Le chiffre gravé sur l’objectif

Regardez le fût de l’objectif : la mention « 0,17 » indique l’épaisseur de lamelle prévue par le constructeur. Un tiret signifie que l’objectif tolère l’absence de lamelle.

L’écart d’épaisseur crée une aberration sphérique. Elle reste discrète à faible grossissement. Elle devient gênante avec les objectifs à sec de forte ouverture numérique, à partir de 40× environ.

Les objectifs à immersion dans l’huile sont moins sensibles, car l’huile et le verre ont des indices proches. Certains objectifs à sec portent une bague de correction. Elle se règle sur l’épaisseur réelle de la lamelle.

Les numéros d’épaisseur

Les lamelles se vendent par numéro. Les plages ci-dessous sont celles que les fabricants indiquent le plus souvent.

NuméroÉpaisseur usuelleUsage
n° 00,085 à 0,13 mmMontages épais, cas particuliers
n° 10,13 à 0,16 mmRoutine, faible grossissement
n° 1,50,16 à 0,19 mmObjectifs corrigés pour 0,17 mm
n° 20,19 à 0,23 mmManipulation plus robuste

Le milieu de montage ajoute sa propre épaisseur entre l’objet et la lamelle. Pour la fluorescence ou l’imagerie fine, préférez le n° 1,5 et un montage mince.

L’épaisseur varie aussi d’une lamelle à l’autre dans une même boîte. Pour les applications exigeantes, il existe des lamelles à tolérance resserrée, souvent marquées n° 1,5H.

Le format se choisit d’après la préparation. Prenez 18 × 18 ou 22 × 22 mm pour une goutte. Prenez 24 × 50 ou 24 × 60 mm pour une coupe ou un frottis. La lamelle doit couvrir toute la zone observée, sans dépasser de la lame.

Lames : bords coupés ou rodés

La lame standard mesure 76 × 26 mm, pour 1 mm d’épaisseur environ.

  • Bords coupés. C’est le modèle le plus économique. Les arêtes sont vives : manipulez-les avec soin.
  • Bords rodés. Les arêtes sont adoucies, à 90° ou à 45°. Le risque de coupure et d’éclats diminue.
  • Plage dépolie. Une zone mate ou colorée reçoit le marquage au crayon ou au feutre.
  • Lame à cavité. Une cuvette accueille une goutte pour l’observation de micro-organismes vivants.

Vérifiez aussi l’état de surface annoncé. Certaines lames sont livrées prêtes à l’emploi, d’autres demandent un dégraissage préalable.

Lames chargées : quand les utiliser

Les lames dites chargées portent un traitement de surface qui retient les coupes de tissu et les cellules. Elles évitent le décollement pendant les bains successifs.

Elles servent surtout en histologie, en immunohistochimie et en cytologie. Pour un frottis simple ou une observation à l’état frais, une lame ordinaire suffit.

Les bons gestes

  1. Saisir par les bords

    Les traces de doigts diffusent la lumière.

  2. Poser en biais

    Abaissez la lamelle depuis un côté pour chasser les bulles.

  3. Vérifier l’objectif

    Contrôlez la mention d’épaisseur avant une observation à fort grossissement.

  4. Éliminer

    Jetez lames et lamelles dans un collecteur pour objets coupants.

Au catalogue MIMÉLEC

Lames, lamelles et boîtes de rangement pour la microscopie de routine.

Prix de vente hors taxes ; prix TTC calculé avec une TVA à 20 %.

Article publié sur https://mimelec.com/guides/lames-lamelles-epaisseur

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